一、产品概述
（一）产品主要组成成分
诺如病毒PCR反应液A、诺如病毒PCR反应液B、内标、阴性质控品、阳性质控品（具体内容详见产品说明书）
（二）产品预期用途
本产品用于体外定性检测人粪便样本中的诺如病毒GI与GII型核酸，并可对GI与GII开展分型。
本产品用于诺如病毒感染的辅助诊断。
本试剂盒检测结果仅供临床参考，不得作为临床诊断的唯一标准。建议结合患者临床表现与其他实验室检测对病情开展综合研究。
（三）产品包装规格
24人份/盒、48人份/盒、96人份/盒。
（四）产品检验原理
本试剂盒利用实时荧光PCR技术，以诺如病毒GⅠ、GⅡ型基因组高度保守区为靶区域，设计特异性引物与荧光探针，然后对靶序列开展PCR扩增，同时通过Taqman荧光探针技术实时监控扩增产物的累积，实现对样本中诺如病毒核酸的定性检测。本试剂盒反应体系中含有dU-UNG酶防污染体系，以避免假阳性结果。
二、临床前研究概述
（一）主要原材料
1.主要原材料的选择
主要原材料包括：引物、探针、 Taq 酶、逆转录酶、RNA 酶抑制剂、UNG 酶、dN(U)TP。
主要原材料均为外购。申请人对主要原材料开展了供应商的选择，通过功能性试验等，筛选出合格供应商，制定了各主要原材料的质量标准并经检验合格。
2.企业参考品设置情况
申请人设计了完整的企业参考品，包括阴性参考品、阳性参考品、检测限参考品与精密度参考品。参考品均按照基于临床样本制备而成。
阴性参考品7份（N1-N7），N1-N6 由试剂盒检测范围外不同病原体阳性的临床样本组成，N7 由质粒组成。阳性参考品6份（P1-P6），由不同型别与浓度水平的临床样本组成。检测限参考品2份（L1-L2），由不同型别的临床样本组成。精密度参考品4份（R1-R4），由不同型别的中强阳、弱阳浓度水平临床样本组成。
（二）生产工艺及反应体系研究
申请人通过功能性试验确定最佳的生产工艺及反应体系，包括：样本采集及处理、核酸提取用的样本体积、洗脱体积与PCR加样体积、试剂用量、反应条件确认等。
（三）研究性能评估
本产品研究性能评估内容主要包括： 准确度、精密度、最低检测限、研究特异性、包容性等。申请人提交了有效运行的质量管理体系下生产的三批产品的性能评估资料。
在准确度研究中，申请人按照基于三批试剂盒检测企业参考品，结果显示：阳性符合率与阴性符合率均为100%，结果均符合要求。
在精密度研究中，申请人按照基于三批试剂，分别对阴性、临界阳性与中阳性临床样本分别开展重复性与实验室内精密度、实验室间精密度研究。结果显示，试剂盒批内/批间、日内/日间、不同操作者间、仪器间、实验室间均有着很好的检测精密度。
在最低检出限的研究中，申请人按照基于三批试剂，通过梯度稀释诺如病毒GI型与诺如病毒GII型样本开展检测，以检出率≥95%时所对应的浓度水平作为试剂盒的最低检出限，并开展最低检出限验证。经最终确定本试剂盒的最低检出限为500 copies/mL。
研究特异性研究包括交叉反应研究与干扰物质研究。
在交叉反应研究中，对试剂盒检测范围内与试剂盒检测范围外的病原体开展交叉反应验证。结果显示，诺如病毒GI型与诺如病毒GII型之间无交叉反应。与检测靶标种属相近或引起症状相似的其他病原体，包括A组轮状病毒、B组轮状病毒、C组轮状病毒、札如病毒、40型肠道腺病毒、41型肠道腺病毒、星状病毒、沙门氏菌、志贺氏菌、肠道病毒71型、大肠杆菌、幽门螺旋杆菌、诺如病毒GIII型、诺如病毒GV型、诺如病毒GVI型、诺如病毒Ⅳ型、痢疾志贺氏菌、肠炎沙门氏菌、小肠结肠炎耶尔森菌、金黄色葡萄球菌、溶藻弧菌、空肠/结肠弯曲菌、嗜水气单胞菌、拟杆菌属、乳酸杆菌、厌氧消化链球菌、单纯疱疹病毒1/2型、水痘-带状疱疹病毒、甲型肝炎病毒、戊肝病毒、金黄色葡萄球菌、卡他莫拉菌、草绿色链球菌、奈瑟菌属、黏液罗氏菌与变形杆菌均无交叉反应。
在干扰试验中，申请人对样本中可能存在的内外源性干扰物质、粪便中未消化的食物纤维开展了研究，结果显示，甘油三酯(≤1mmol/L)、血红蛋白（500mg/dL）、白细胞（1×1010/L）、黏蛋白(≤1mg/mL）、妥布霉素（3µg/mL）、诺氟沙星（3mg/L）、青霉素（20 U/mL）、氨苄青霉素（6μg/mL）、克林霉素（15mg/L）、头孢唑林（100 µg/mL）、红霉素（12 mg/L）、利巴韦林（2 mg/L）、甲基泼尼松龙（20mg/L）、胃康灵（500mg/L）、乳酸菌素（3600.0mg/L）、双歧杆菌三联活菌胶囊（500 mg/L）、粪便中未消化的食物纤维：纤维素（1 mg/mL）、木质素（0.5mg/mL）对本试剂盒的检测结果无干扰。在竞争性干扰性能评估中，使用一种低浓度的研究物与一种高浓度研究物混合感染设置，评估同一反应管中诺如病毒GI型与诺如病毒GII 型间竞争干扰影响，结果显示，同一致本中存在混合感染时不会对检测造成干扰。
在包容性研究中，申请人按照基于三批试剂，对不同来源的诺如病毒GI与GII型的临床样本开展重复性与最低检出限验证，检测结果均符合要求。
（四）阳性判断值研究
申请人按照基于来源于不同地区的250例临床样本开展研究，按照基于受试者工作特征曲线（ROC）法计算，诺如病毒GⅠ型与GⅡ型的阳性判断值Ct值为40。
（五）稳定性研究
申请人对本产品的实时稳定性、使用稳定性、运输稳定性及样本稳定性开展了研究，确定了各种条件下试剂及样本的有效保存时间。
实时稳定性研究，申请人按照基于三批次试剂储存于-18℃以下条件下，在不同时间点按照技术要求开展检验，确定试剂可在-18℃以下避光保存，有效期12个月。
此外，申请人对产品的使用稳定性、运输稳定性与样本稳定性分别开展了研究。
三、临床评价概述
申请人在广州医科大学附属妇女儿童医疗中心、江西省儿童医院、湖南省儿童医院与宜昌市中心人民医院共4家临床试验机构开展了临床试验。按照基于试验体外诊断试剂与一代测序与已上市试剂开展比较研究，确认产品的临床性能。临床试验入组人群为具有诺如病毒感染相关症状/体征的疑似患者，样本类型为粪便。
与一代测序开展比较研究时，共纳入 728例样本，其中阳性 445例（GI 与GII 型总阳性样本量），阴性 283例，阳性符合率 99.55%（95%CI：98.38%，99.88%），阴性符合率100%（95%CI：98.66%，100%）；针对GI型，阳性223例，阴性505例，阳性符合率99.1%（95%CI：96.79%，99.75 %），阴性符合率100%（95%CI：99.25%，100%）；针对GII型，阳性248例，阴性480例，阳性符合率100%（95%CI：98.47%， 100%），阴性符合率100%（95%CI：99.21%，100%）。
与已上市试剂（GI与GII不分型）开展比较研究时，共纳入308例样本，其中阳性210例（其中GI阳性106例，GII阳性105例），阴性98例，阳性符合率100%（95%CI：98.2%，100%），阴性符合率100%（95%CI：96.23%，100%）。
，试验体外诊断试剂的临床性能满足技术审评要求。
四、产品受益风险判定
按照申请人提供的申报资料，经综合评价，目前认为该产品的受益相较而言更多风险，但为保证产品使用安全，基于对主要剩余风险的避免，已在产品说明书中提示以下信息：
1.本试剂盒的检测结果仅供临床参考，对患者的临床诊治应结合其症状/体征、病史、其他实验室检测及治疗反应等情况综合考虑。
2.样本检测结果与样本收集、处理、运送及保存质量密切相关，任何步骤的失误可能结果假阴性结果。
3.样本中诺如病毒浓度过低及样本中诺如病毒待测靶序列的变异或其他原因结果的靶序列改变可能会结果假阴性结果。
4.警示及注意事项：产品说明书中介绍了该产品检验方法的局限性及使用中的注意事项。
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