PD-L1抗体试剂及检测试剂盒注册审查指导原则

本指导原则旨在指导注册申请人对PD-L1抗体试剂及检测试剂盒注册申报资料的准备及撰写，同时也为技术审评部门开展技术审评提供参考。

本指导原则是对基于免疫组织化学方法的PD-L1抗体试剂及检测试剂盒的一般要求，注册申请人应依据产品的具体特性确定其中内容是否适用。若不适用，需具体阐述理由及相应的科学依据，并依据产品的具体特性对注册申报资料的内容开展充实与细化。

本指导原则是对注册申请人与技术审评人员的指导性文件，但不包括注册审批所涉及的行政事项，也不作为法规强制执行，要是有能够满足相关法规要求的其他方法，也可以按照基于，但需要提供详细的研究与验证资料，相关人员应在遵循法规的前提下使用指导原则。

本指导原则是在现行法规与标准体系以及当前认知水平下制定的，随着法规与标准的不断改进以及科学技术的不断发展，相关内容也将适时开展调整。

一、适用范围

本指导原则适用于利用免疫组织化学法，对病理组织切片中PD-L1开展检测的试剂。此类试剂为特异性单克隆或多克隆抗体，或抗体与显色系统、对照试剂、质控片（如有）及其它辅助试剂一同包装成试剂盒形式的检测试剂，用于免疫检查点抑制剂的伴随诊断或补充诊断。

对于按照基于其他方法学的PD-L1检测试剂，可能部分要求不完全适用或本文所述内容不够全面，申请人应参照本指导原则，按照产品特性对适用部分开展评价，并补充其他的评价资料。

本指导原则适用于PD-L1抗体试剂或PD-L1检测试剂盒注册申请与变更注册申请的情形。本指导原则仅针对注册申报资料中的部分内容开展撰写，其他未尽事宜应当符合《关于公布体外诊断试剂注册申报资料要求与批准证明文件格式的公告》等相关法规要求，同时建议参考《定性检测体外诊断试剂研究性能评估注册审查指导原则》等适用的技术文件。

二、注册审查要点

（一）监管信息

1.产品名称及分类编码

产品名称应符合《体外诊断试剂注册与备案管理措施》及相关法规的要求，如PD-L1抗体试剂（免疫组织化学法）与PD-L1检测试剂盒（免疫组织化学法）。按照《体外诊断试剂分类规则》（国家药品监督管理局公告2021年第129号），该产品按照第三类体外诊断试剂管理，分类编码为6840。

2.其他信息还包括产品列表、关联文件、申报前与监管机构的联系情况与沟通记录以及符合性声明等文件。

（二）综述资料

综述资料主要包括概述、产品描述、预期用途、申报产品上市历史及其他需说明的内容。其中，预期用途中应描述用于免疫检查点抑制剂的伴随诊断或补充诊断；产品描述中应详述检测原理、产品主要研究结果的总结与评价、参加国内外质控机构的质控活动情况、与同类与/或前代产品的比较等。

建议以列表的方式开展与同类与/或前代产品的比较研究，比较境内外已批准上市试剂与注册申报产品的克隆号、抗体的性质（如单克隆抗体，IgG1型）、适用的肿瘤组织类型、预期用途、判读方式、产品主要性能等方面的主要区别。

（三）非临床资料

1.产品技术要求

产品技术要求应主要包括以下性能指标：外观、符合性、批内重复性、批间重复性等。其中“符合性”与“重复性”指标，应弄清楚按照基于包括不同表达水平的预期适用肿瘤组织类型组织片开展检测。“重复性”指标建议每种不同表达水平的病理组织类型切片不少于3张。申报试剂如有适用的国家标准、行业标准，则产品技术要求不得低于上述标准要求。另外，产品技术要求中应以附录形式弄清楚主要原材料及生产工艺的要求。

2.研究性能研究

注册申请人应按照基于在符合质量管理体系的环境下生产的试剂盒开展所有研究性能研究，提交具体研究方法、试验方案、试验数据、统计研究等详细资料。

研究性能评估所用样本的基本信息均需弄清楚，例如样本类型、组织类型、细胞片的制备与稀释方式（如适用）、表达水平及确定方法等。研究性能评估用样本应为组织切片、组织芯片，应提供商业化组织芯片相关信息（如生产商、货号等）。

2.1样本稳定性

此部分应至少包括所有适用的组织类型切片在不同储存条件下的实时稳定性研究，研究样本应包括不同表达水平PD-L1阳性样本与阴性样本。研究所用切片的制备应按照基于与说明书一致的方法，如切片的保存温度范围覆盖冷藏与室温，应分别开展稳定性研究，其中室温研究应在声称的最高温度条件下开展。

申请人可通过提交文献或开展实时稳定性研究的方式，支持说明书中蜡块稳定性的声称。

2.2免疫反应性

2.2.1正常组织：对30种正常人体组织（见表1），每种组织类型不少于3例，开展特异性评价，同时对着色位置及染色特点开展描述。

表1 正常组织列表

2.2.2非正常组织：对相关良性、恶性病变组织（示例见表2）开展特异性评价。如有按照基于申报产品为试验材料开展研究的相关文献资料，也可提交文献资料作为抗体试剂或检测试剂盒与非正常组织的免疫反应性的支持资料。

表2 非正常组织列表

2.3特异性

2.3.1交叉反应研究

应开展PD-L1与PD-L2的交叉反应研究，可利用免疫印迹法、免疫组织化学方法对表达不同蛋白的细胞/组织检测，验证抗体的特异性。也可利用其它可靠的方法开展交叉反应研究。

2.3.2特异性识别研究

按照基于免疫印迹法或酶联免疫法等方法验证检测试剂可特异性检测PD-L1的性能。通过添加PD-L1抗原开展检测或检测PD-L1基因敲除肿瘤细胞等方法，验证检测试剂的特异性。

2.4精密度

精密度研究应按照基于随机盲法开展，样本应为消除识别信息的预期样本（未染色样本），包括阴性、阳性及一定数量阳性判断值附近的阴性与阳性样本（建议合计不少于总样本量的10%），研究数据应包括评分结果及着色位置，按照基于可靠的统计方法（如Wilson Score法）开展判读一致性评价。如阴性一致率百分比（Negative Percent Agreement，NPA）、阳性一致率百分比（Positive Percent Agreement，PPA）、总体一致率（Overall Percent Agreement, OPA）及双侧95%置信区间。研究应制定适当的接受标准，建议一致率95%置信区间下限均不低于85%。

2.4.1内部重复性

2.4.1.1检测内精密度：对连续切片的预期组织类型样本，开展检测重复性研究。

2.4.1.2检测间精密度

对可能影响检测精密度的主要变量开展验证，包括不同批次间（不少于3批次）、不同仪器间、日间、操作者间与阅片者间（不少于3人）。同一阅片者两次阅片之间应设置可靠的记忆清除期（脱敏期），此段时间一般不少于两周。

2.4.2外部重复性

在至少3个外部独立检测实验室开展研究，研究应包括对非连续日间、不同阅片者间、不同外部实验室间的评价。

2.5灵敏度

研究对不同分期、预期组织类型样本的检出能力。研究样本应包括不同表达水平（如：0-100%）与染色强度（如适用），并计算所有样本检测的阳性率与不同染色强度的阳性样本比例（如适用）。

2.6提供企业内部质控片验证资料：按照主要原材料研究资料中的企业内部质控片设置情况，按照基于三批产品对企业内部质控片开展检验并提供详细的试验数据。

2.7反应体系

2.7.1样本采集与处理

简述样本的固定、包埋的要求，包括但不限于固定剂的选择、固定时间与温度要求、包埋条件等。上述条件要求可引用规范性操作手册，也可通过研究确定。

建议申请人对切片厚度、载玻片的要求开展研究，或提交相关文献资料，确定适用的切片厚度范围与载玻片类型。

2.7.2抗原修复

详述抗原修复方法与参数条件，包括方法、时间、温度、pH值的确定依据。如抗原修复液可重复使用，应提交重复使用次数限定的研究资料。

2.7.3最适抗体滴度/浓度确定的研究。

2.7.4检测体系反应条件确定

申请人应考虑脱蜡水化、酶阻断、抗体孵育、显色、复染等步骤对产品性能的影响，通过试验确定上述条件的最佳组合。常规免疫组织化学检测步骤的确定，可引用行业与企业内部规范性操作手册或文献，但应对确定后的检测步骤开展性能验证。

2.7.5质量控制

申报产品应形成可有效监测染色过程的质量控制方法，弄清楚推荐用作质控的组织类型与制备方法，提交染色结果可接受标准确定的研究资料。弄清楚同型对照试剂染色结果的可接受标准，并提交研究资料。

3.稳定性研究资料

稳定性研究主要包括实时稳定性（有效期）、运输稳定性、开瓶（开封）稳定性、机载稳定性与稀释稳定性（如适用）研究，注册申请人可按照实际需要选择可靠的稳定性研究方案。稳定性研究资料应包括研究方法的确定依据、具体的实施方案、详细的研究数据以及结论。对于实时稳定性研究，应提供至少三批产品在实际储存条件下保存至声称有效期后的研究资料。

4.阳性判断值研究

此类产品的阳性判断值，部分来源于药物临床试验的疗效数据。典型的阳性判断值研究包括形成与验证两部分，两部分研究样本应相互独立。

形成阳性判断值使用的样本应满足药物临床试验设计并考虑到不同的地理区域、民族（种族）、性别、年龄、不同病理分期等因素。可按照基于基于评价指标如客观缓解率（ORR）的最佳总体反应绘制受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic curve, ROC）的研究方式，综合其他临床应用考量，来选择确定可靠的阳性判断值。提交不同评分方法（如TPS、CPS）选择的研究资料。

申请人也可参考既往经验或已上市同类产品，通过ROC等研究方式来拟定申报产品的阳性判断值，该阳性判断值应与参考的同类产品的阳性判断值一致。参考形成的阳性判断值招募受试者直接进入药物主要疗效临床试验，并对阳性判断值开展验证（如适用）。

5.其他资料

5.1主要原材料研究资料

此产品的主要原材料包括第一抗体、显色系统、封闭液、同型对照抗体、质控片、企业内部质控片等。应提供主要原材料的选择与来源、制备过程、质量控制标准等相关研究资料。考虑到产品注册单元的不同，申请人应按照产品注册单元的实际情况，递交相应原材料资料。如主要原材料为企业自制，应提供其详细制备过程；如主要原材料源于外购，应提供资料包括：选择该原材料的依据及比较筛选试验资料、生产商提供的质量标准、出厂检验报告，以及该原材料到货后的质量检验资料，供应商应固定，不得随意更换。

5.1.1第一抗体

5.1.1.1克隆选择研究

应提交克隆筛选试验资料，包括试验方法、筛选原则、与公认抗体的比较研究等。应弄清楚抗体所针对的抗原表位、抗体制备所用免疫原。

5.1.1.2抗体性质鉴定

应提交抗体性质鉴定研究资料，包括：抗体的特异性、亲与常数及效价、抗体的类型及亚型等的验证。提供抗体识别位点的验证。申请人可通过放射性免疫研究法、双向琼脂扩散法、酶联免疫吸附法、免疫印迹法、凝胶电泳等方法开展研究。

5.1.2酶标第二抗体系统的选择及验证

检测试剂盒中的第二抗体系统一般均为外购，应详述酶标第二抗体系统的确定依据，弄清楚外购方名称，提交外购方出具的检验证书，详述申请人对酶标第二抗体系统相关主要原材料的技术指标。

5.1.3质控片（如适用）

建议在试剂盒中设置质控片，质控片可以为已知表达的阴、阳性细胞（系）或组织样本。应提交质控片细胞或组织类型选择的依据、质控片PD-L1表达情况确定的研究资料与质控片染色接受标准确定资料。

5.1.4同型对照抗体（如适用）

为有效识别检测过程中可能出现的非特异性染色，建议试剂盒（配套）包括同型对照抗体。简述同型抗体的动物源性、亚型、浓度、纯度等基本信息。

5.1.5封闭液

封闭液应能够封闭非特异结合、内源性酶活性或内源性生物素等。

5.1.6其他主要原辅料的选择及验证资料，如牛血清白蛋白、抗原修复液、抗菌剂等。

该类主要原辅料一般均为外购，应说明有生物活性的原辅料的外购方名称，提交外购方出具的检验证书，详述申请人对每一种原辅料的质量要求。

5.1.7企业内部质控片

详述企业内部质控片的组成，包括组织类型、例数与表达水平。应提供对企业内部质控片组织类型与表达水平的确定依据，建议按照基于临床上普遍认为质量较好的同类试剂开展确认。企业内部质控片，应包括所有适用的肿瘤组织类型、不同表达水平与染色强度。

（四）临床评价资料

该类试剂应通过临床试验路径开展临床评价，临床试验包括产品临床检测性能研究与临床意义研究两部分。临床试验应符合《体外诊断试剂注册与备案管理措施》《医疗器械临床试验质量管理规范》与《体外诊断试剂临床试验技术指导原则》的要求，如相关法规、文件有更新，临床试验应符合更新后的要求。下面仅说明该类产品临床试验中应关注的重点问题。

1.临床检测性能研究

1.1产品临床试验结果重现性研究

基于免疫组化法的PD-L1检测试剂操作程序与结果判读较为复杂，该类检测试剂临床应用的重复性是产品重要的临床性能，产品临床试验应按照《PD-L1检测试剂临床试验—结果重现性研究注册审查指导原则》要求开展结果重现性研究。

1.2与已上市同类产品的比较试验

如原研伴随诊断试剂在境内已经上市，针对该药物的非原研PD-L1检测试剂，应开展试验体外诊断试剂与原研伴随诊断试剂的一致性比对，确认产品临床检测性能。

1.2.1临床试验机构

应选择具备相应条件且按照规定备案的医疗器械临床试验机构开展临床试验。临床试验机构数量应不少于3家，且具有免疫组织化学相关专业优势，试验操作人员应有足够的时间熟悉检测系统的各环节（仪器、试剂、质控及操作程序等），熟悉评价方案。在整个试验中，试验体外诊断试剂与比较方法均应处于有效的质量控制下，最大限度保证试验数据的准确性及可重复性。

1.2.2临床试验方法

临床试验应选择已上市的原研伴随诊断试剂作为比较试剂，评价申报产品与原研伴随诊断试剂检测结果的一致性。

1.2.3临床试验受试人群的选择

临床试验的受试人群应来自产品的预期适用人群。如待评价产品PD-L1检测试剂盒预期用途为定性检测中性福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）的食管鳞状细胞癌（ESCC）组织中的PD-L1蛋白表达，则入组病例应为临床弄清楚诊断为食管鳞状细胞癌的病例。

因为更加科学的评价产品性能，临床试验应入组部分PD-L1表达阳性阈值（用于指导抗肿瘤药物使用的阈值）临近范围内病例。

1.2.4.临床试验样本类型

PD-L1检测试剂临床试验研究的样本类型为中性福尔马林固定石蜡包埋的病理组织样本（FFPE样本）。临床样本的采集建议按照相关实验室检测技术规范要求执行。

1.2.5临床试验样本量

临床试验主要评价指标为试验体外诊断试剂与原研伴随诊断试剂检测结果的一致性。临床试验阳性样本与阴性样本数量应分别满足统计学要求，可按照基于目标值法公式分别估算最低阳性与阴性样本例数。

样本量估算公式如下：

公式中，n为样本量；Z1-α/2、Z1-β为显著性水平与驾驭度的标准正态分布的分数位，P0为评价指标的临床可接受标准，PT为申报产品评价指标预期值。

其中阳性符合率与阴性符合率的临床可接受标准（P0）建议不低于85%。临床试验结果中，相关评价指标的95%置信区间下限应不低于预设的临床可接受标准。

1.2.6临床试验结果的统计研究

临床试验结果一般以四格表的形式开展总结，并据此计算试验体外诊断试剂与比较方法的阳性符合率、阴性符合率、总符合率及其95%置信区间。

临床试验建议对不同染色强度或不同评分的样本数量开展描述性统计研究，产品临床试验入组样本应涵盖不同的染色强度或不同评分。

2.临床意义研究

该类产品临床意义包括伴随诊断与补充诊断可归结成两种。本文重点介绍伴随诊断临床意义的研究，该部分研究应满足《与抗肿瘤药物同步研发的原研伴随诊断试剂临床试验注册审查指导原则》与《抗肿瘤药物的非原研伴随诊断试剂临床试验注册审查指导原则》要求。原研伴随诊断试剂与非原研伴随诊断试剂临床意义的研究存在差异，以下开展分别介绍。关于补充诊断临床意义的研究建议参照伴随诊断试剂临床意义研究。

2.1原研伴随诊断试剂

原研伴随诊断试剂为参与药物临床试验的伴随诊断试剂，包括直接参与药物临床试验或与药物临床试验中所用CTA（Clinical Trial Assay,以下简称“CTA”）开展桥接试验。针对原研伴随诊断试剂，药物临床试验作为其伴随诊断临床意义的支持性证据，相关临床试验资料应满足《与抗肿瘤药物同步研发的原研伴随诊断试剂临床试验注册审查指导原则》要求。以下仅针对PD-L1检测试剂产品特点，对该类产品临床试验需特别关注的问题开展阐述。

2.1.1关于原研PD-L1检测试剂在药物临床试验中的伴随诊断作用，建议在药物临床试验方案及报告中弄清楚，如作为受试者入选标准，或作为后续病例不同PD-L1表达状态的人群药效学研究。关于PD-L1检测，可按照药物临床试验方案的要求，使用前瞻性收集的样本或使用留存样本开展检测。

2.1.2 支持原研PD-L1检测试剂临床意义的药物临床试验应包括相关抗肿瘤药物疗效的全部根本性临床试验。如支持药物上市的临床试验为境内与境外开展的临床试验，则原研伴随诊断试剂的临床试验应包括境内与境外开展的临床试验，仅境内临床试验不足以支持产品上市。

2.1.3药物临床试验方案或报告中应弄清楚伴随诊断试剂的基本信息及配套使用试剂、适用机型信息，按照方案或报告中提供的伴随诊断试剂信息应能够对应至申报的伴随诊断试剂。临床试验资料应弄清楚申报产品在药物临床试验过程中的判读方法及阳性判断值，上述阳性判断值应与申报产品临床前研究及结果重现性研究所用阳性判断值一致。

2.2非原研伴随诊断试剂

针对非原研伴随诊断试剂，可按照基于桥接试验或已上市抗肿瘤药物疗效的通过了解性研究可归结成两种临床评价路径确认其伴随诊断临床意义。相关临床试验资料应满足《抗肿瘤药物的非原研伴随诊断试剂临床试验注册审查指导原则》要求。以下仅针对PD-L1检测试剂产品特点，对该类产品临床试验需特别关注的问题开展阐述。

2.2.1桥接试验

若按照基于桥接试验确认其伴随诊断临床意义，在研究过程中应严格控制偏倚，因该类产品临床试验所用样本为福尔马林固定石蜡包埋样本，临床试验中样本稳定性应满足试验体外诊断试剂要求，应尽量控制试验体外诊断试剂与原研伴随诊断试剂（如涉及）所用样本的差异，应不对临床试验产生显著影响。临床试验应严格按照申报产品及原研伴随诊断试剂（如涉及）说明书开展操作。如纳入了非药物临床试验的病例，则该部分病例的入组标准应与药物临床试验保持一致。申报产品的检测应满足盲法的原则。

2.2.2已上市抗肿瘤药物疗效的通过了解性研究

针对非原研PD-L1检测试剂，如无法通过桥接试验确认其伴随诊断临床意义，亦可在完成临床检测性能研究的基础上，在不少于3家临床试验机构开展已上市抗肿瘤药物疗效的通过了解性研究，证明其临床意义。该临床试验过程中申报产品的检测结果不能影响受试者正常的诊疗流程。

2.2.2.1入组人群

临床试验入组人群应为原研伴随诊断试剂适用人群，应弄清楚病例的入选与排除标准，临床试验入组的人群应尽量接近申报产品临床应用真实情况。临床试验应注意入组病例的用药情况，如单药治疗或与化疗药物联合治疗等，临床试验中入组病例的用药情况应与原研伴随诊断试剂批准的用药情况保持一致。

2.2.2.2临床试验药效学评价

抗肿瘤药物疗效评价有多个评价指标，如客观缓解率（ORR）、无进展生存期（PFS）及总生存期（OS）等。临床试验应选择可靠的评价指标，并提供充分的依据。抗肿瘤药物疗效评价指标的选择，可参考相关抗肿瘤药物临床试验主要评价指标。

2.2.2.3样本量估算

已上市抗肿瘤药物疗效的通过了解性研究临床评价目的包括申报产品与原研伴随诊断试剂筛选人群的药物疗效比较，基于此目的，建议选择可靠的统计学要是检验类型，进而完成相应的样本量估算。针对不同的适应证，建议针对相应的统计学检验要是设置可靠的检验界值。该试验样本量估算过程中，可参考相应原研伴随诊断试剂参与的药物临床试验样本量。

2.2.2.4统计研究

临床试验的统计研究主要分为三个方面：病例人口学及临床特征基线研究、申报产品与原研伴随诊断试剂的一致性研究、药物疗效研究。药物疗效研究的结果应表明申报产品所选择人群药物疗效满足临床需求。

3.补充诊断产品相关考虑

产品预期用途为补充诊断的PD-L1检测试剂，其临床试验建议参考伴随诊断用途研究的临床试验设计。针对提交药物临床试验资料作为产品补充诊断临床意义的，应在药物临床试验报告或相关文件中针对不同PD-L1的人群开展药效学分层研究，分层研究的结果应支持产品补充诊断的临床意义。

4.接受境外临床试验的考虑

针对产品临床检测性能研究部分，基于境内外相关产品临床使用环境及人员的差异，不能接受境外临床试验数据。

针对伴随诊断试剂临床意义研究，如相关抗肿瘤药物接受境外临床试验数据，且有证据证明境外人群PD-L1表达及相关人群抗肿瘤药物疗效无显著差异的前提下，原研伴随诊断试剂及非原研伴随诊断试剂的伴随诊断临床意义研究可接受境外临床试验数据。

（五）产品说明书与标签样稿

产品说明书格式应满足《体外诊断试剂说明书编写指导原则》的要求。产品说明书的所有内容均应与注册申请人提交的注册申报资料的相关研究结果保持一致。如某些内容引用自参考文献，则应以规范格式对此内容开展标注，并单独列明参考文献的相关信息。

1.【预期用途】

应至少包括以下内容：

1.1试剂盒用于体外检测中性福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）的xxxx组织中的PD-L1蛋白表达。辅助鉴别可使用xxx药物治疗的xxx患者，用作xxx药物的伴随诊断。如申报产品为补充诊断预期用途，应在说明书中弄清楚检测结果可能提示XXX药物的疗效。

1.2 PD-L1阳性表达判读规则（TPS、CPS等）。

1.3简单介绍PD-L1的生物学特征，如基本结构与信号转导途径。

1.4简单介绍PD-L1检测的临床用途与药物临床试验相关内容。

1.5弄清楚说明对任何阳性或阴性结果的研究，应由病理医生结合病理形态学、临床表现及其它检测方法开展，不作为单独的诊断指标。

2.【检测原理】

    简述免疫组织化学的基本原理，并对申报试剂的抗原修复方法、第一抗体、放大系统、显色系统及结果通过了解等开展简要介绍。

3.【主要组成成分】

3.1说明试剂盒包括组分的名称、数量、比例或浓度等信息；质控片（如有）的组织名称。

3.2对检测中使用的抗体信息开展简单介绍，包括抗体的克隆性质（单克隆或多克隆）、抗体的类型（如IgG1)、抗体的种属性、克隆号、抗体制备形式（如细胞培养上清液）、免疫源。

3.3试剂盒中不包括但对该项检测必需的组份，企业应列出相关试剂的名称、货号、注册证号/备案号及其他相关信息。

4.【储存条件及有效期】

对试剂的储存条件、有效期、开封稳定性、机载稳定性、运输稳定性（如适用）与冻融次数限制等信息做详细介绍。

5.【样本要求】

重点弄清楚以下内容：

5.1应弄清楚对适用样本的取材、固定、包埋的具体要求。

5.2弄清楚样本的稳定性。

6.【检测方法】

详细说明操作的各个步骤：

6.1弄清楚检测需要的仪器、设备。如预处理仪、染色仪等。

6.2试剂配制方法、注意事项，试剂开封、配制后使用方法及注意事项等。

6.3手工操作应详述脱蜡与水化、组织抗原修复、第一抗体孵育、显色等各操作步骤。描述应尽量细化，需弄清楚各步骤处理时间及pH值等内容。如第一抗体为浓缩型抗体，还需弄清楚抗体工作液的浓度或比例及稀释液的详细信息。

6.4质量控制：弄清楚每一批次检测样本均应同时开展内、外阳性/阴性质控染色及待测样本的同型对照抗体的染色。质控应包括阳性、阴性不同PD-L1浓度水平的细胞系细胞或不同PD-L1表达水平（染色强度）的组织切片。为用户提供可作为阳性与阴性，内（如适用）、外对照的组织名称。详述质控片制备的要求及质控结果的要求（试验有效性的判断），以及质控结果不符合要求的处理方式。

7.【检验结果的解释】

7.1配合彩色图片对染色特点开展说明。

7.2对可能出现的异常情况，如非特异染色、染色过浅等，开展说明，并弄清楚指出出现该情况后的处理方法。

7.3评分方法

列明评分标准，包括对通过了解方法、读取细胞个数的要求、计数细胞性质（如肿瘤细胞、免疫细胞）、染色特点、评分规则等。

8.【检测方法的局限性】

综合产品的预期用途、临床背景、检测方法及适用范围等信息，对可能出现的局限性开展相关说明，主要包括以下描述，请申请人选择适用的条款在产品说明书中予以阐述。

8.1免疫组织化学检测是一种需通过多个检测步骤完成的诊断过程。在试剂的选择、取材、固定、处理、切片的制备与染色结果的解释上需要开展专门的培训。

8.2任何阳性或阴性结果的研究，应由病理科医生结合病理形态学、临床表现及其它检测方法开展，不作为单独的诊断指标。

8.3复染过度或不足都可能影响结果的判读。

8.4不恰当的染色前组织的处理过程直接影响染色效果，造成假阳性、抗体定位不准确或假阴性结果。结果纷歧致可能是由样本固定与包埋方法不同或组织样本内固有差异造成的。

8.5阴性结果表示未检出抗原，纷歧定表示样本中无该抗原存在。待测抗原编码基因变异、抗原低表达或抗原修复不当等，都会造成抗原无法检出。

8.6已知可能引起非特异性染色的情形。如感染乙型肝炎病毒并含有乙肝病毒表面抗原的人体组织，可能表现出辣根过氧化酶的非特异性染色；因为蛋白质或底物反应产物的非免疫结合等。

8.7本试剂仅对经10%中性缓冲福尔马林固定石蜡包埋的组织开展了验证（如适用），不得用于其它样本类型或流式细胞检测等其他用途。

9.【产品性能指标】

简述免疫反应性、精密度、特异性、灵敏度等各项性能指标与临床试验数据总结，列明研究方法与研究结果。

10.【注意事项】

应至少包括以下内容：

10.1 密切相关试剂盒内人源组份（如有）生物安全性的警告。

10.2 密切相关试验操作中涉及试剂的安全性提示，包括对有毒有害物质的防护及危险物品的处理方法等。

三、参考文献

[1]国家病理质控中心, 中华医学会病理学分会, 中国临床肿瘤学会肿瘤病理专家委员会.实体肿瘤PD-L1免疫组织化学检测专家共识(2021版)[J].中华病理学杂志, 2021, 50(7):9.

[2]周彩存,王宝成,程颖,等.中国非小细胞肺癌免疫检查点抑制剂治疗专家共识(2020年版)[J].中国肺癌杂志, 2021, 24(4):19.

[3]中华医学会肿瘤学分会.中华医学会肺癌临床诊疗指南(2025版)[J].中华医学杂志, 2025, 105(34):2918-2959.

[4]中华人民共与国国家卫生健康委员会.原发性肺癌诊疗指南(2022年版)[J].中国可靠用药探索, 2022, 19(9):28.

[5]国家药品监督管理局.关于公布体外诊断试剂注册申报资料要求与批准证明文件格式的公告：国家药品监督管理局公告2021年第122号[Z].

[6]国家药品监督管理局医疗器械技术审评中心.定性检测体外诊断试剂研究性能评估注册审查指导原则：国家药品监督管理局医疗器械技术审评中心通告2022年第36号[Z]

[7]国家市场监督管理总局.体外诊断试剂注册与备案管理措施：国家市场监督管理总局令第48号[Z].

[8]国家药品监督管理局.体外诊断试剂分类规则：国家药品监督管理局公告2021年第129号[Z].